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生物樣品活化方法

更新時間:2025-04-14   點擊次數(shù):179次
植物ELISA檢測試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗體包被于酶標(biāo)板上,實驗時樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的抗原會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素??贵w與結(jié)合在包被抗體上的抗原結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,抗原濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中指標(biāo)的濃度。
生物樣品中的通常以無活性的形式存在,在檢測指標(biāo)活性前必須進行活化處理。
活化方法如下:
血清、血漿:280μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40μL樣品,混勻,加入40μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了10倍!
細胞培養(yǎng)上清:20μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入100μL樣品,混勻,加入40μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了2倍!
組織勻漿:1960μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40μL樣品,混勻后檢測。
注意:樣品被稀釋了50倍!

TEL:18101607379

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